D-冷光素鈉鹽、D-蟲熒光素鈉 103404-75-7
D-熒光素鈉
通用名:D-冷光素鈉鹽、D-蟲熒光素鈉
化學名稱:4,5-二氫-2-(6-羥基-2-苯并噻唑基)-4-噻唑羧酸鈉;(S)-2-(6-羥基-2-苯并噻唑基)-2-噻唑啉-4-羧酸鈉;(S)-4,5-二氫-2-(6-羥基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸鈉鹽
分子式:C11H7N2NaO3S2
分子量:302.3
儲存條件:-20°C
溶解度:溶于水
外觀:橙紅色粉末
CAS號:103404-75-7
分子式:C11H7N2NaO3S2
分子量:302.3
純度:≥99%
保存:-20℃
D-熒光素鈉鹽產品說明:
D-熒光素(D-Luciferin)是螢火蟲熒光素酶底物,其量子效率為0.88,是Luminol的20倍。反應原理為鎂離子存在下熒光素酶使熒光素與ATP反應,接著它被氧化形成二氧雜環丁烷結構并發出黃綠色的光。Luciferin-luciferase發光用于ATP監控以測定細胞活力以及細菌計數。它還用于報告基因檢測。可與小動物活體成像系統配套使用,用于標記LUC基因后的體內活體熒光檢測。也應用于體外分析,高通量測序和各種污染檢測。
D-熒光素有三種產品形式,D-熒光素(D-Luciferin,free acid)、D-熒光素鉀鹽(D-Luciferin,potassium
salt)和D-熒光素鈉鹽(D-Luciferin,sodium
salt),三種形式都易溶于水,在絕大多數的應用上都沒有實質性的差別。它們的激發和發射波長分別為328nm和533nm。
使用方法(僅供參考):
(一)活體成像分析方法
1.用DPBS(不含Mg2+、Ca2+)配制15mg/mL的D-Luciferin工作液,0.2μm濾膜過濾除菌。
2.注射量10μL/g的體重,如10g重小鼠,注射100μL工作液(1.5mg D-Luciferin)。
3.腹腔注射10~15分鐘后,上機進行圖像分析。
(二)體外分析方法
1.用無菌水配置200×的D-Luciferin儲備液(30mg/mL),立即使用,或-20℃保存。
2.用預熱好的完全培養基1:200稀釋D-Luciferin儲備液,配制150μg/mL工作液。
3.去除細胞培養基。
4.向細胞中添加1×的D-Luciferin工作液,37℃孵育5~10min,進行圖像分析。
注意事項:
1.鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性,鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響,溶解D-Luciferin應使用無鈣鎂離子的PBS,且要完全溶解。
2.本品要進行避光操作和保存。儲存液過濾除菌后可分裝于-20℃或-80℃凍存。
3.動物類型體重,以及注射方式都會影響信號的發射,建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線,確定最佳信號平臺期和最佳的檢測時間。
4.在體外圖像分析前,將細胞進行37℃的短時間培養可以增加信號強度。
5.進行ATP的檢測,盡量避免外源ATP的污染。
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